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技術(shù)文章

蜂蜜含量的色譜檢測(cè)

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    蜂蜜是蜜蜂從開(kāi)花植物的花中采得的花蜜在蜂巢中釀制的蜜。蜜蜂從植物的花中采取含水量約為75%的花蜜或分泌物,存入自己第二個(gè)胃中,在體內(nèi)多種轉(zhuǎn)化的作用下,經(jīng)過(guò)15天左右反復(fù)醞釀各種維生素、礦物質(zhì)和氨基酸豐富到一定的數(shù)值時(shí),同時(shí)把花蜜中的多糖轉(zhuǎn)變成人體可直接吸收的單糖葡萄糖、果糖,水分含量少于23%存貯到巢洞中,用蜂蠟密封。蜂蜜是糖的過(guò)飽和溶液,低溫時(shí)會(huì)產(chǎn)生結(jié)晶,生成結(jié)晶的是葡萄糖,不產(chǎn)生結(jié)晶的部分主要是果糖。

  5-HMF由葡萄糖或果糖脫水生成,分子中含有一個(gè)呋喃環(huán),一個(gè)醛基和一個(gè)羥甲基,其化學(xué)性質(zhì)比較活潑,可以通過(guò)氧化、氫化和縮合等反應(yīng)制備多種衍生物,是重要的精細(xì)化工原料。

  《中國(guó)藥典》中采用液相色譜法分析檢測(cè)蜂蜜中的5-HMF,作為測(cè)定蜂蜜含量的質(zhì)量評(píng)價(jià)依據(jù),實(shí)驗(yàn)以乙腈-0.1%甲酸為流動(dòng)相,用鳥(niǎo)苷作為定位物質(zhì)。

  液相色譜系統(tǒng)(濟(jì)南上地電子科技有限公司)由高壓恒流泵與UV紫外檢測(cè)器直接構(gòu)成等度分析系統(tǒng)。使用專(zhuān)業(yè)工作站可以同時(shí)控制高壓恒流泵、紫外檢測(cè)器及恒溫柱箱等,具備多元高壓洗脫、波長(zhǎng)掃描等功能。廣泛應(yīng)用于研究開(kāi)發(fā)、醫(yī)藥檢驗(yàn)、食品檢測(cè)、化工分析、環(huán)境監(jiān)測(cè)等眾多分析領(lǐng)域。

  樣品準(zhǔn)備:取樣品1 g,置于燒杯中,精密稱(chēng)定,加10%甲醇適量溶解,并分次轉(zhuǎn)移至50 mL量瓶中,精密加入鳥(niǎo)苷對(duì)照品溶液1 mL,加10%甲醇至刻度,搖勻即得。

 

  實(shí)驗(yàn)步驟:精密吸取待測(cè)液10 μL進(jìn)樣,領(lǐng)取鳥(niǎo)苷對(duì)照品溶液,5-HMF對(duì)照品溶液各10 μL進(jìn)樣,用以確定樣品色譜圖中5-HMF及鳥(niǎo)苷的色譜峰,進(jìn)行計(jì)算。

 

  色譜條件:

色譜柱

InertSustain AQ-C184.6×250mm,5μm

流動(dòng)相

乙腈-0.1%甲酸(V/V,5:95

柱溫

35℃

檢測(cè)波長(zhǎng)

284 nm,254 nm

流速

1.0 ml/min

進(jìn)樣量

10 μL

 

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